Chemické pokusy/Izolace DNA

	Izolace DNA
Chemikálie	Banán nebo jahody, ethanol, chlorid sodný (NaCl), voda, detergent, EDTA
Pomůcky	Mixér, kádinka (400 ml), filtrační papír, odsávací baňka, Büchnerova nálevka, vodní vývěva, odměrný válec, skleněná tyčinka, zkumavky, mikropipeta
	Některá data mohou pocházet z datové položky.

Popis

Deoxyribonukleová kyselina (DNA) je nukleová kyselina, která je nositelkou genetické informace organismů. Je tvořena polynukleotidovými řetězci.

EDTA je zkratka používaná pro kyselinu ethylendiamintetraoctovou a její soli. Patří do skupiny chelatačních činidel. Váže na sebe ionty kovů a s nimi vytváří komplexní sloučeniny. Využívá se například při snížení tvrdosti vody, v pracích a mycích prostředcích nebo také k detoxikaci těla.

Molekula DNA
Struktura EDTA

Po rozmixování dojde k oddělení buněk. EDTA inhibuje enzymy obsahující kovy, které mohou poškodit DNA. Po přidání ethanolu se vytvoří vrstva směsi a vrstva ethanolu na jejichž rozhraní dojde k vysrážení DNA.

Postup

Ethanol dáme na pár minut vychladit do mrazáku.
Menší banán nebo jahody rozmixujeme v mixéru společně s 200 ml vody a poté do směsi přidáme 2 g chloridu sodného.
Získanou směs přefiltrujeme.
Do filtrátu přilijeme 30 ml detergentu a EDTA - počkáme 5 minut.
Následně do zkumavky přelejeme 3 ml směsi. Zkumavku držíme pod úhlem asi 45° a po stěně postupně přidáváme mikropipetou 3 ml vychlazeného ethanolu.
Po přidání ethanolu můžeme pozorovat vysrážení vláken DNA, které můžeme zkusit namotat na dřevěnou špejli.

Přefiltrované směsi banánu a jahod
Směs s vychlazeným ethanolem